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抗体的基本概念及用途

来源:菲恩生物   发布时间:2020-04-13 09:55   点击量:

1.什么是抗体?
抗体又称免疫球蛋白,由一种B细胞终末分化成的浆细胞所分泌,是血浆中γ球蛋白的主要构成成分,被有机体免疫系统用来鉴别和中和外源物质,如细菌、病毒等有害微生物或花粉、灰尘等过敏原。这一特性是由其结构特征决定的。抗体整个大分子呈Y型,由2条重链和2条轻链通过二硫键连接而成,每条链都包含一个高度保守的恒定域Fc区和一个可变域Fv区。抗体Y型结构的两个分叉顶端都包含一个被称作抗原互补位(complementarity determining region,CDR)的锁状结构,该结构在B细胞增殖分化过程中被筛选,每个单独的浆细胞分泌的抗体该结构只针对一种特定的抗原表位。形象的说,就像一把钥匙仅能开一把锁一样,一种抗体只能和一种抗原相结合,这种结合依赖于CDR区和抗原决定簇的结构互补,靠两种分子多肽链间的氢键、范德华力、电荷作用和疏水作用结合在一起。基于这一特性,我们利用抗体来标记或者示踪我们感兴趣的目标分子。
抗体结构
2.抗体的用途
随着生命科学的发展和人类基因组计划的完成,成千上万的未知蛋白进入人们的视野,围绕着蛋白展开的研究越来越多,抗体试剂因其结合特异性和易于标记酶、荧光素的特点在各种实验中的使用越来越广泛。几十年前,科学家们需要自己独立完成所需要的抗体的制备,进入上世纪90年代,生物公司开始接手这项业务,相关领域的研究飞速发展,各种成果竞相涌现。抗体在免疫性疾病治疗和诊断中的应用相继被发明,由此也衍生出了现代多个抗体相关行业,包括科研型抗体、治疗性抗体药物以及诊断性抗体试剂等。时至今日,科研抗体仍是目前应用最基础、广泛的生物活性试剂之一,多种生物学研究领域随处可见它的身影,如癌症研究、心血管研究、信号转导、神经科学、免疫学研究、表观遗传学等。
 
抗体应用 描述
酶联免疫吸附实验(ELISA) 不仅能够对特定的蛋白进行定量分析,还可以研究分子之间的相互作用或其他特性
蛋白质印迹(WB) 确定样品间蛋白的相对表达水平
免疫组织化学(IHC) 揭示了样本内抗原的组织特异性和亚细胞定位,在完整组织中对于蛋白表达的分析更有优势
免疫细胞化学(ICC) 研究蛋白的亚细胞分布
流式细胞术和细胞分选(FACS) 测量细胞某些化学和物理特性的一种手段
免疫沉淀(IP) 分离纯化单一或复合蛋白的最常用的一种方式。抗体被固定在固相基质(如磁珠/琼脂糖小球)上,从而从复杂溶液中捕获抗原
染色质免疫沉淀(ChIP) 用来确定特定蛋白是否与体内特定DNA序列相互作用

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