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  • 实验中Sirt1靶点3大检测详解
    实验中Sirt1靶点3大检测详解
    Sirt1是一个全长747aa的NAD依赖的脱乙酰化酶, 属于sirtuin家族。翻译后修饰的SIRT1是一个110-130kda的蛋白质,包含一个脱乙酰酶sirtuin型结构域。TNF-alpha处理可诱发C末端缺失的75-80kda的SirT1片段, 另外SirT1存在一个57-61kda的亚型。SIRT1可能存在于核仁、核常染色质、异染色质和内膜中。它能在细胞核和细胞质之间穿梭。SIRT1通过催化关键蛋白的去乙酰化来调节细胞凋亡和肌肉分化等过程,在氧化应激和DNA损伤修复中发挥重要作用。···
    2021-02-02 点赞数图标
  • 常见6种Western Blot封闭液的优缺点
    常见6种Western Blot封闭液的优缺点
    封闭是Western Blot 至关重要的一部分, 所以正确的封闭液选择可以让抗体更特异地和抗原结合,为成功的WB奠定基础。虽然这个步骤操作简单,但是封闭液的选择确是很多科研人员的难题。为了让大家更方便的选择适合自己实验的封闭液,这里给大家介绍6种不同的封闭液,以及它们的优缺点。 1、脱脂奶粉 最便宜而且最好买的封闭剂就属脱脂奶粉了。无论是从化学制品公司还是从超市购买,都可以直接拿来使用。通常封闭液的浓度为 2.5-5% (w/v)。但···
    2020-12-21 点赞数图标
  • elisa试剂盒操作流程及8大注意事项
    elisa试剂盒操作流程及8大注意事项
    不同厂家对于elisa试剂盒的操作要求也不尽相同,有些需要放置-20℃,有些则需要4℃保存,即使是同样的试剂盒,每个人对说明书的解读也有万千差异,以洗板后的拍板为例,一千个人阅读说明书,就有一千种拍板方式。不少人甚至认为ELISA操作是个体力活,拿出科比扣篮的架势;还有小伙伴突发奇想,让孔板自然干燥,最终出现了读数高、CV值高、背景高的「三高」结果。此时若有一则操作视频指导,便能一目了然。 一、说明书中洗板步骤 Manual:Di···
    2020-09-09 点赞数图标
  • 提高单抗融合率的6大影响因素
    提高单抗融合率的6大影响因素
    刚开始做单抗的时候难免会碰到细胞融合不成功或者是融合率比较低的情况,现在小编就总结几点影响融合率的因素,希望能够对做实验的科研工作者有点帮助。1.融合之前一定要取小鼠血检测效价,效价高于2万才比较适合做融合,低于2W效价的融合效果可能会不太理想。 2.骨髓瘤细胞SP2/0的状态很重要,一定要保证细胞状态非常好、无污染、大面积死亡现象,融合前一定要保持细胞对数生长期。 3.融合使用的PEG、胎牛血清质量直接决定了融合率高低···
    2020-07-17 点赞数图标
  • 菲恩生物预吸附二抗实验原理
    菲恩生物预吸附二抗实验原理
    对于经常进行抗体检测工作的人来说,非特异性结合和背景着色常常是一大困扰,某些情况下二抗存在交叉反应是主要原因。 二抗,即第二抗体,是能和抗体结合,即抗体的抗体,其主要作用是检测抗体的存在,放大一抗的信号。二抗的制备一般是利用抗体是大分子的蛋白质具有抗原性的性质,去免疫异种动物,由异种动物的免疫系统产生的针对于此抗体的免疫球蛋白。因此二抗实际上也是多抗,本身的特性决定了其大概率会存在交叉反应。 针对这···
    2020-05-05 点赞数图标
  • 抗体的基本概念及用途
    抗体的基本概念及用途
    1.什么是抗体? 抗体又称免疫球蛋白,由一种B细胞终末分化成的浆细胞所分泌,是血浆中γ球蛋白的主要构成成分,被有机体免疫系统用来鉴别和中和外源物质,如细菌、病毒等有害微生物或花粉、灰尘等过敏原。这一特性是由其结构特征决定的。抗体整个大分子呈Y型,由2条重链和2条轻链通过二硫键连接而成,每条链都包含一个高度保守的恒定域Fc区和一个可变域Fv区。抗体Y型结构的两个分叉顶端都包含一个被称作抗原互补位(complementarity determining ···
    2020-04-13 点赞数图标
  • 蛋白免疫印迹法实验操作指南
    蛋白免疫印迹法实验操作指南
    蛋白质印迹法(免疫印迹试验)即Western Blot。它是分子生物学、生物化学和免疫遗传学中常用的一种实验方法。其基本原理是通过特异性抗体对凝胶电泳处理过的细胞或生物组织样品进行着色。通过分析着色的位置和着色深度获得特定蛋白质在所分析的细胞或组织中表达情况的信息。具体操作流程如下: 一、蛋白样本的制备 1.样本的处理 (1)组织样本处理:取待测组织样本,用预冷的PBS洗去组织表面血液及内 部杂物。称重剪碎,加入适量RIPA裂解液混···
    2019-12-12 点赞数图标
  • ELISA试剂盒中的基质效应
    ELISA试剂盒中的基质效应
    2001年6月,美国曾爆出过一个大新闻:因为临床诊断中,hCG 免疫检测试剂盒得到了假阳性结果,使一位名叫Jennifer Rufer的女性被误诊为癌症,因此经历了长期化疗、肺部手术、甚至子宫切除。当事人把医院和诊断试剂公司告上法庭,获得了1620万美元的赔偿,创下当时医疗事故的最高赔偿金额。 痛苦的遭遇,巨额的赔偿,就因一个hCG检测假阳性结果而起,这太坑了!法院把责任判给了诊断试剂公司和医院,但这事的始作俑者其实是一种被称为“基质效应”···
    2019-10-26 点赞数图标

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